ヒトの遺伝子検査の実際
特定の遺伝子を増やすPCR法（2）
特定の遺伝子を増やすPCR法（2）
遺伝子検査に不可欠なＰＣＲ法の原理を簡単に説明してみましょう。
ＰＣＲ法はＲＮＡも用いますが、今回はＤＮＡを対象に説明します。
ＤＮＡは、２本鎖の安定なはしごの様に塩基が結合しています。
このＤＮＡに９０℃以上の熱を加えると塩基の結合が離れて１本ずつ
になります。
この時点で、それぞれに２本に分かれた１本鎖のＤＮＡのある特定の
塩基配列に結合する短い塩基配列のプライマーという２０個ほどの
ＤＮＡ断片のようなものを結合させます。
分かれた１本鎖のＤＮＡにそれぞれ結合するプライマーはある一定の
温度で結合を始めます。
この反応はアニーリングと言ってプライマーに含まれている塩基の種類
によって反応温度が異なりますが、通常５５〜６０℃で結合します。
この時、それぞれのプライマーは前もって調べたいＤＮＡの特定遺伝子
範囲を挟み込むように塩基配列を決定し、センスプライマー、アンチプラ
イマーの２種類のプライマーを作成します。
そして、この２種類のプライマーはポリメラーゼと言う酵素により７２℃で
反応し、次々と反応液中の塩基を取り込んで伸びてゆきます。
これをＰＣＲにおいて伸長と言います。
熱変性（９４℃）→アニーリング（５５〜６０℃）→伸長（７２℃）の１サイクル
で１本のＤＮＡは２本のＤＮＡになります。
つまり１サイクルでＤＮＡは２倍に増幅します。